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新推出的高性能紫外LED與高端氘燈的穩定性相當,峰值波動為0.005%以下。 UV-C LED提供了類似的靈敏度,同時降低了用于固定波長檢測的整體儀器的成本和尺寸。這樣,當制造商需要單個或幾個固定波長時,能幫助最終用戶合理使用實驗室面積。此外,LED提供更長的使用壽命并立即打開,確保LED壽命不會浪費在預熱中,這一點與氘燈不同。此外,來自LED的光線可以很容易地光纖耦合,這在需要隔離流動池的應用中十分有利。制造商可以選擇UV-C LED作為固定波長檢測器的替代光源,并且構建更具成本效益的系統。
對于固定波長HPLC系統來說,成本的最大差異通常源于初始配置的成本,因為它包括光源和其他輔助設備。使用LED檢測器的HPLC系統需要電源、光電二極管和分束器。帶有LED的HPLC檢測器系統的總成本約為750美元。相比之下,使用氘光源的HPLC系統需要更昂貴的設備來建造。必要的電源昂貴得多,并且需要空間來存放燈。此外,氘燈是廣譜光源,在紫外線范圍內發射許多波長的光。 這需要使用昂貴的過濾器和單色儀進行固定波長HPLC檢測。因此,典型的系統成本預計將接近4,000美元。圖1顯示了使用氘燈(a)與UV-C LED(b)的典型儀器設計。
降低DNA純度測量的成本
接下來要談到的使用UV-C LED的另一個例子是DNA濃度和純度測量。DNA的提取確保了生物學研究的完整性,會影響很多領域,如生物技術、法醫學、基因組研究和藥物。這包括遺傳障礙的檢測、DNA指紋的產生、以及遺傳工程生物的產生。
在這些應用中,提高生產效率和降低成本的關鍵集中于測量的速度和準確性。DNA和蛋白質在260nm和280nm處有吸收峰,并且這些波長處的吸光度分別決定了DNA和蛋白質的濃度,而吸光度的比率決定了DNA樣品的純度。用于DNA濃度和純度測量的光譜儀依賴于氙氣閃光燈,它們提供了即時的開/關,可以快速評估在寬濃度范圍內高線性度的測量。
雖然廣譜紫外線燈(比如氙氣閃光燈)可以在多個波長(大部分光能在可見光譜中)產生充足的光,但只有特定波長的光才能用于單個參數的測量。由于DNA純度是通過在260nm和280nm處進行的吸收測量來確定的,所以必須使用其他的部件,例如濾光鏡和反射鏡,在廣譜燈的光照射到樣品之前濾除不要的波長。氙氣閃光燈還需要高電壓并且在點燈期間增加電子設備的防護。這些昂貴的電子設備加上其他光學組件,迅速增加了儀器的總體成本。